外傷或中風(fēng)引起的腦損傷是成人死亡和殘疾的主要原因。不幸的是，很少有干預(yù)措施對腦組織損傷后修復(fù)有效。

在關(guān)于內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生是否確實發(fā)生在成年人腦中的長期爭論之后，現(xiàn)在有大量證據(jù)支持其發(fā)生。盡管損傷通常會顯著刺激神經(jīng)發(fā)生，但神經(jīng)干/祖細胞內(nèi)源分化的修復(fù)潛力通常不足。另外，外源干細胞移植在動物模型中顯示出有希望的結(jié)果，但長期存活率差和神經(jīng)元分化效率低等局限性使其在臨床應(yīng)用中仍然具有挑戰(zhàn)性。

成人神經(jīng)再生的多功能策略：干細胞移植修復(fù)受損大腦的途徑

在這篇綜述中，我們旨在總結(jié)成人神經(jīng)發(fā)生三個不同方面的歷史研究和最新進展：內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生、外源性干細胞移植和直接膠質(zhì)細胞到神經(jīng)元的轉(zhuǎn)換。

內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生：關(guān)于神經(jīng)再生基礎(chǔ)的爭論

20世紀初，西班牙著名神經(jīng)科學(xué)家Ramon y Cajal聲稱神經(jīng)發(fā)生僅發(fā)生在胚胎發(fā)育過程中。因此，幾十年來人們一直相信成人大腦中不會出現(xiàn)新的神經(jīng)元。Altman（1962）通過提供第一個證據(jù)證明成年嚙齒動物大腦中可以產(chǎn)生新的神經(jīng)元，對這一觀點提出了挑戰(zhàn)。雖然隨后的證據(jù)支持這種可能性，但相應(yīng)的放射自顯影和組織學(xué)技術(shù)被認為是有爭議的，并且多年來對這一新興領(lǐng)域的關(guān)注較少。20世紀90年代，基于抗體的生物標志物檢測方法等新技術(shù)的迅速發(fā)展，越來越多的證據(jù)進一步支持了成年嚙齒動物大腦中神經(jīng)發(fā)生的存在。

室下區(qū)（SVZ）和顆粒下區(qū)（SGZ）是成年嚙齒動物大腦中兩個特征明確的神經(jīng)源性生態(tài)位。然而，神經(jīng)發(fā)生是否發(fā)生在成年人身上仍然存在爭議。因此，在解決改善ABI結(jié)果的神經(jīng)源性策略之前，有必要考慮支持或反駁這一重要概念的論點。

經(jīng)典神經(jīng)源性生態(tài)位：嗅球、紋狀體和皮質(zhì)中SVZ衍生的神經(jīng)發(fā)生

二十多年前，成年神經(jīng)發(fā)生領(lǐng)域的先驅(qū)團體之一Alvarez-Buylla及其同事將SVZ星形膠質(zhì)細胞鑒定為成年嚙齒類動物大腦中的神經(jīng)干細胞 (NSC)。后來研究人員發(fā)現(xiàn)，在小鼠和大鼠中，SVZ中的NSC可以通過遷移到紋狀體或皮層并分化為神經(jīng)元來對中風(fēng)引起的腦損傷做出快速反應(yīng)。動物研究中鼓舞人心的結(jié)果使許多科學(xué)家和臨床醫(yī)生相信通過刺激SVZ內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生來促進紋狀體和皮質(zhì)中風(fēng)后神經(jīng)修復(fù)的可行性。新方法為成人大腦中神經(jīng)發(fā)生的存在提供了新的證據(jù)。

經(jīng)典神經(jīng)發(fā)生生態(tài)位：海馬SGZ衍生的神經(jīng)發(fā)生

海馬體是學(xué)習(xí)和記憶最重要的大腦區(qū)域。它非常容易受到腦損傷，并且也受到癡呆癥，特別是阿爾茨海默病的影響。齒狀回SGZ中的NSC可以補充海馬神經(jīng)元，以整合到現(xiàn)有的神經(jīng)回路中。20世紀90年代，F(xiàn)red Gage小組報告了大鼠和小鼠的年齡依賴性海馬神經(jīng)發(fā)生。嚙齒動物的神經(jīng)源性活動可以通過豐富的環(huán)境和跑步來增強。

新穎的神經(jīng)源性生態(tài)位

嚙齒類動物的成年神經(jīng)發(fā)生可能不僅限于SVZ和SGZ，因為在其他腦區(qū)也有報道，如下丘腦、黑質(zhì)和杏仁核。與SVZ和SGZ相比，這些大腦區(qū)域的神經(jīng)發(fā)生似乎表現(xiàn)出年齡依賴性下降。隨著人類研究的深入，探索這些新的潛在神經(jīng)源性生態(tài)位是否可能在損傷后恢復(fù)中具有治療相關(guān)性將會很有趣。

總而言之，經(jīng)典神經(jīng)源性生態(tài)位中的成體神經(jīng)發(fā)生在嚙齒類動物中得到了充分研究，但在人類中仍然存在爭議。表格1）。

神經(jīng)源性生態(tài)位	主要技術(shù)	成人神經(jīng)發(fā)生	參考
SVZ	免疫染色	不	薩奈等人，2011
		是的	金等人，2006
	IdU 標記、14 C 標記、免疫染色	是的	恩斯特等人，2014
SGZ	BrdU 標記、免疫染色	是的	埃里克森等人，1998
	14 C標記、免疫染色	是的	斯伯丁等人，2013
	免疫染色	是的	丹尼斯等人，2016
		不	諾蓋拉等人，2018；索雷爾斯等人，2018
	體視免疫染色	是的	博爾德里尼等人，2018
	單細胞測序、免疫染色	不屬于人類	弗蘭吉克等人，2022
		是的	周等人，2022

目前可以獲得大量有關(guān)健康成人神經(jīng)發(fā)生的信息，并且在TBI或中風(fēng)患者中，只要可以獲得高質(zhì)量的大腦樣本。在許多創(chuàng)傷性腦損傷和中風(fēng)病例中，皮質(zhì)、紋狀體和海馬體是受影響的關(guān)鍵大腦區(qū)域。如果成年人的神經(jīng)發(fā)生在這些區(qū)域得到證實，那么開發(fā)增強內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生的藥物策略對于補償神經(jīng)元損失可能非常有價值。

然而，由于內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生在成年人中似乎充其量也極其有限，因此依靠這種機制可能不足以切實改善患者的治療結(jié)果。因此，需要探索利用外源性神經(jīng)源的補充策略來恢復(fù)ABI病例的神經(jīng)功能。

外源干細胞移植：安全且有效？

由于內(nèi)源性神經(jīng)發(fā)生可能不足以修復(fù)腦損傷，因此引入外源性干細胞成為一種有前途的補充或替代策略。近年來，干細胞移植已在動物模型中廣泛探索，以治療腦和脊髓損傷以及神經(jīng)退行性疾病。盡管這些研究證明了不同干細胞療法在動物模型中具有強大的神經(jīng)保護和神經(jīng)修復(fù)能力，并引發(fā)了多項臨床試驗，但目前尚不清楚這些策略是否有益于腦損傷患者。

干細胞的來源

干細胞的常見來源：包括間充質(zhì)干細胞/基質(zhì)細胞 (MSC)、胚胎干細胞 (ESC)、誘導(dǎo)多能干細胞 (iPSC) 和神經(jīng)干細胞，所有這些細胞至少可以在體外分化為成熟的神經(jīng)元。

干細胞治療常用的不同干細胞的特點總結(jié)如下：表2

細胞類型	來源	優(yōu)勢	壞處	參考
間充質(zhì)干細胞	各種成人組織	來源廣泛，倫理問題較少，移植排斥和腫瘤發(fā)生的風(fēng)險低	神經(jīng)分化能力有限	烏魯?shù)賮喌热耍?019；Fri?ová 等人，2020
神經(jīng)干細胞	流產(chǎn)胎兒的大腦	神經(jīng)分化的比能力	來源極其有限，存在重大倫理問題、移植排斥和腫瘤發(fā)生的風(fēng)險	哈里森，2012；Fri?ová 等人，2020
胚胎干細胞	胚胎	高效神經(jīng)分化	來源有限和主要倫理問題、移植排斥和腫瘤發(fā)生的風(fēng)險	Fri?ová 等人，2020；瓦拉德茲-巴爾巴等人，2020
誘導(dǎo)多能干細胞	原則上任何組織，通常是皮膚或血液	來源無限，無倫理問題，移植排斥風(fēng)險低	操作過程中基因組的不穩(wěn)定性、技術(shù)/經(jīng)濟障礙、致瘤風(fēng)險	Fri?ová 等人，2020；瓦拉德茲-巴爾巴等人，2020

干細胞移植治療腦損傷的動物研究

迄今為止，人們已經(jīng)做出了大量努力來研究干細胞移植對嚙齒動物腦損傷模型的影響。二十多年前，靜脈注射大鼠骨髓來源的間充質(zhì)干細胞被用于治療大鼠腦缺血性損傷。

為了更好地適應(yīng)潛在的臨床并發(fā)癥，后來的研究將非人類靈長類動物甚至人類干細胞引入嚙齒動物模型中。例如，移植用視黃酸處理的猴源ECS來誘導(dǎo)神經(jīng)細胞，可顯著改善實驗性腦損傷小鼠的運動功能。

此后不久，據(jù)報道，在中風(fēng)小鼠模型中，猴胚胎干細胞誘導(dǎo)的神經(jīng)元祖細胞在移植后存活并增殖直至4周。同樣，之前的研究表明，人類胎兒神經(jīng)干細胞在移植到缺血性中風(fēng)大鼠體內(nèi)后至少4周內(nèi)會分化為神經(jīng)元并增殖。

干細胞移植治療腦損傷的臨床試驗

這些有希望的結(jié)果加速了干細胞療法在創(chuàng)傷性腦損傷、中風(fēng)和其他腦損傷的臨床試驗中的應(yīng)用。

在一項涉及97名治療TBI患者和69名對照TBI患者的臨床試驗中，通過腰椎穿刺將自體骨髓來源的間充質(zhì)干細胞移植到蛛網(wǎng)膜下腔后，未報告明顯的不良反應(yīng)，并且運動功能得到改善。通過類似的程序，使用臍帶間充質(zhì)干細胞和胎兒神經(jīng)和造血細胞的療法也表現(xiàn)出安全性，但在TBI恢復(fù)中的療效有些有限。

對于中風(fēng)治療，改良的骨髓間充質(zhì)干細胞（SB623細胞）被認為是安全的，并且在一項包含18名患者的I/IIa期研究中提供了顯著的臨床改善。一項對65名接受干細胞治療和58名接受安慰劑治療的患者進行的隨機對照II期研究表明，靜脈注射多能成體祖細胞通過了安全性評估，但主要終點神經(jīng)功能恢復(fù)尚未達到。

此外，一項針對23名中風(fēng)患者的多中心單臂研究得出結(jié)論，胎兒神經(jīng)干細胞腦內(nèi)植入是可行的，并且可以適度改善上肢功能，其中一名患者在治療3個月后有所改善，三名患者在治療6-12個月后有所改善。

盡管試驗間差異較大（即累積移植細胞劑量從1×106至1×109個細胞不等），但干細胞移植的安全性和可行性已在幾乎所有臨床試驗中得到證實，不良反應(yīng)可接受且較低腫瘤發(fā)生的機會。然而，必須指出的是，幾乎所有已發(fā)表的臨床研究都是I/II期試驗，治療組患者少于100名。盡管有一些跡象表明某些適應(yīng)癥有好處，但統(tǒng)計功效不足以得出干細胞治療后神經(jīng)功能恢復(fù)顯著改善的結(jié)論，而且主要終點主要顯示治療組和對照組之間差異不大。表3）。

ABI型	臨床試驗類型	患者體型	干細胞類型/劑量	主要結(jié)論	參考
創(chuàng)傷性腦損傷	非隨機、開放標記、干預(yù)性隊列研究	97例接受治療，69例控制	骨髓間充質(zhì)干細胞/5×10 6	97名患者中有38名的意識或運動功能得到改善	田等人，2013
	隨機、單盲對照臨床研究 (ChiCTR-TNRC-11001528)	20名治療者和20 名對照者	UC-MSCs/4×10 6	通過FMA和FIM 評估改善神經(jīng)功能	王等人，2013
	隨機研究，未指定	38名治療者和38 名對照者	人胎腦、神經(jīng)及造血肝組織/200×10 6	治療促進意識覺醒和神經(jīng)康復(fù)
缺血性中風(fēng)	單臂、開放標簽研究、I/IIa 期試驗 (NCT01287936)	18名患者接受治療（3組，每組6名患者）	改良BM-MSC (SB623)/2.5×10 6、5.0×10 6或10×10 6	治療與12個月時的改善相關(guān)	斯坦伯格等人，2016
	隨機、雙盲、安慰劑對照、II 期試驗 (NCT01436487)	65名接受治療的患者和58名接受安慰劑的患者	多能成體祖細胞/4×10 8 –1.2×10 9	主要終點無顯著改善	赫斯等人，2017
	多中心、單臂、開放標簽研究 (EudraCT 2012-003482-18)	23治療	人胎兒NSCs/2×10 7	23名患者中有4名上肢運動得到改善	繆爾等人，2020

膠質(zhì)細胞到神經(jīng)元的直接轉(zhuǎn)換：損傷后神經(jīng)發(fā)生的新時代？

與其他類群相比，哺乳動物的神經(jīng)膠質(zhì)細胞比例較高。在無脊椎動物模型（如秀麗隱桿線蟲或黑腹果蠅）的大腦中，神經(jīng)膠質(zhì)細胞的比例不到25%。相比之下，小鼠大腦中約65%的細胞是膠質(zhì)細胞。早期研究表明，人腦中約有一萬億個神經(jīng)膠質(zhì)細胞，神經(jīng)膠質(zhì)細胞與神經(jīng)元的比例為10:1。然而，最近的證據(jù)表明，膠質(zhì)細胞與神經(jīng)元的比例為1:1更準確地描述了成人大腦，膠質(zhì)細胞的數(shù)量估計下降到4000-1.3億個。有趣的是，在成人大腦中，包括星形膠質(zhì)細胞、小膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞前體（OPCs）在內(nèi)的膠質(zhì)細胞可以不斷產(chǎn)生子細胞。

如果神經(jīng)膠質(zhì)細胞向神經(jīng)元的轉(zhuǎn)化真的發(fā)生了，那么神經(jīng)膠質(zhì)細胞就可能代表一個內(nèi)源性的、幾乎無限的細胞池，用于補充腦損傷后失去的神經(jīng)元。我們將重點關(guān)注ABI的潛在治療應(yīng)用，并在下文中總結(jié)了 “神經(jīng)膠質(zhì)細胞到神經(jīng)元 “細胞轉(zhuǎn)換的最新進展。

星形膠質(zhì)細胞到神經(jīng)元的重編程

雖然星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元最初都起源于NSCs，但這兩種細胞類型最終都產(chǎn)生于特定的、命運受限的（神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞）祖細胞，它們表現(xiàn)出不同的分化路徑。因此，通過簡單而可行的重編程方法發(fā)現(xiàn)從星形膠質(zhì)細胞到神經(jīng)元的直接轉(zhuǎn)換路徑是一項重大突破。

OPC到神經(jīng)元重編程

成熟的髓鞘化少突膠質(zhì)細胞為大型神經(jīng)軸突提供髓鞘，對保障神經(jīng)連接至關(guān)重要。然而，人們認為它們的增殖潛力極為有限。相比之下，廣泛存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）灰質(zhì)和白質(zhì)區(qū)域的一小部分表達NG2的OPCs，可以很容易地增殖并分化成成熟的少突膠質(zhì)細胞。盡管OPCs具有干細胞特性，但其是否也能生成星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元仍存在爭議。2008年，Rivers等人報告說，NG2+膠質(zhì)細胞主要能在前腦產(chǎn)生少突膠質(zhì)細胞，在較小程度上能產(chǎn)生神經(jīng)元，但不能在灰質(zhì)或白質(zhì)產(chǎn)生星形膠質(zhì)細胞。因此，需要更多確鑿證據(jù)來說服科學(xué)家和臨床醫(yī)生相信在體內(nèi)對NG2+膠質(zhì)細胞進行重編程的可行性。

小膠質(zhì)細胞到神經(jīng)元的重編程

小膠質(zhì)細胞是特化的中樞神經(jīng)系統(tǒng)駐留巨噬細胞，來源于胚胎卵黃囊中的原始髓樣前體細胞。在大多數(shù)研究中，研究人員關(guān)注的重點是小膠質(zhì)細胞的吞噬功能，如清除受損神經(jīng)元的碎片，以及它們在中風(fēng)后神經(jīng)炎癥中作為促炎和抗炎狀態(tài)調(diào)節(jié)器的雙重作用。

表4總結(jié)了神經(jīng)膠質(zhì)細胞-神經(jīng)元直接重編程的主要研究成果。

有趣的一點是，在所有類型的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷中，包括中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷和脊髓損傷，神經(jīng)膠質(zhì)疤痕都會迅速形成，并在初期起到防止損傷擴大的屏障作用。然而，在慢性恢復(fù)階段，神經(jīng)膠質(zhì)疤痕會抑制神經(jīng)再生并誘發(fā)神經(jīng)炎癥反應(yīng)。膠質(zhì)疤痕主要由反應(yīng)性星形膠質(zhì)細胞組成，此外還有NG2+膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞，它們在損傷后會被激活并迅速增殖。

如上所述，據(jù)報道，所有這三種類型的膠質(zhì)細胞都可能具有直接重編程為神經(jīng)元的能力。這為治療腦損傷提供了一種誘人的策略：抑制膠質(zhì)細胞的活化以限制膠質(zhì)疤痕的形成并減輕過度炎癥，同時利用膠質(zhì)細胞的增殖能力將其重新編程為功能性神經(jīng)元。

結(jié)論與展望

神經(jīng)元損傷的特征是ABI后立即發(fā)生，并且在慢性階段損傷將進一步加劇，導(dǎo)致進行性神經(jīng)元死亡。為了盡量減少或防止這種結(jié)果，確認成人神經(jīng)發(fā)生的存在至關(guān)重要。然而，考慮到成人大腦中的神經(jīng)發(fā)生似乎非常有限，即使在受傷后迅速受到刺激，這種機制也可能是不夠的。另外，外源干細胞移植已在臨床試驗中顯示出安全性和可行性；然而，其療效仍有待III期研究驗證。

同樣，神經(jīng)膠質(zhì)細胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)化的進展為腦損傷后的神經(jīng)發(fā)生開辟了一條新途徑，但其可靠性仍不確定。目前關(guān)于成體神經(jīng)發(fā)生的基礎(chǔ)及其通過干細胞移植和神經(jīng)膠質(zhì)細胞到神經(jīng)元轉(zhuǎn)換進行神經(jīng)修復(fù)的潛力的知識總結(jié)于圖1。

盡管神經(jīng)發(fā)生在成人大腦中的存在仍存在爭議，但預(yù)計損傷刺激的神經(jīng)發(fā)生只能在有限程度上彌補神經(jīng)元的損失。外源移植間充質(zhì)干細胞、胚胎干細胞、神經(jīng)干細胞或誘導(dǎo)多能干細胞被認為可替代性地增強損傷后的神經(jīng)發(fā)生，并已在臨床試驗中進行了評估。

最近的研究進一步提出，神經(jīng)膠質(zhì)細胞（包括星形膠質(zhì)細胞、OPCs和小膠質(zhì)細胞）有可能重編程為神經(jīng)元，并在腦損傷后補充神經(jīng)元群體，這為腦損傷治療提供了一條新途徑。

研究技術(shù)的不斷改進正穩(wěn)步拓寬我們在成體神經(jīng)發(fā)生領(lǐng)域的知識。總之，盡管仍然存在巨大的障礙，但毫無疑問，利用定向干細胞移植療法修復(fù)大腦的新時代已經(jīng)到來。

參考資料：Zhao J, Liu S, Xiang X, Zhu X. Versatile strategies for adult neurogenesis: avenues to repair the injured brain. Neural Regeneration Research. 2024 Apr;19(4):774-780. DOI: 10.4103/1673-5374.382224. PMID: 37843211; PMCID: PMC10664121.

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