干細(xì)胞治療慢性腎病的一項(xiàng)評(píng)估安全性和臨床可行性的研究

背景：慢性腎臟病 (CKD) 是一個(gè)日益嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題，現(xiàn)有的治療方法不足以限制疾病進(jìn)展。新的策略，包括基于再生細(xì)胞的療法，已經(jīng)成為治療的替代品。包括我們自己在內(nèi)的幾個(gè)小組的結(jié)果報(bào)告了間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 (MSC) 在CKD小鼠模型的功能恢復(fù)和組織損傷預(yù)防中的支持作用。在這些數(shù)據(jù)的推動(dòng)下，開展了一項(xiàng)開放性試點(diǎn)研究，以評(píng)估單次注射自體脂肪組織來源的 MSCs (AT-MSCs) 治療CKD的安全性和有效性。

介紹

慢性腎臟病 (CKD) 的特征是腎功能進(jìn)行性和永久性喪失。由于慢性腎臟病的發(fā)病率和患病率不斷增加、腎臟替代療法的高成本以及發(fā)病率和死亡率的顯著增加，慢性腎臟病代表了一個(gè)主要的公共衛(wèi)生問題。可用的藥物不能阻止疾病進(jìn)展并具有重大風(fēng)險(xiǎn)，因此促使人們尋找新的治療策略。

間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 (MSC) 是多能基質(zhì)細(xì)胞，存在于血管化器官的血管網(wǎng)絡(luò)內(nèi)，在全身具有廣泛的組織支持作用。在糖尿病腎病、部分腎切除術(shù)和同種異體移植物腎病的嚙齒動(dòng)物模型中，已經(jīng)證實(shí)了間充質(zhì)干細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)性急性腎損傷以及慢性腎病中保護(hù)腎臟結(jié)構(gòu)和功能的能力。

間充質(zhì)干細(xì)胞的有益作用包括限制炎癥反應(yīng)、減少蛋白尿以及保護(hù)腎小管和間質(zhì)結(jié)構(gòu)。值得注意的是，全骨髓 (BM) 移植似乎沒有發(fā)揮類似的有益效果。CKD與干細(xì)胞數(shù)量和功能的喪失有關(guān)，尤其是當(dāng)患者進(jìn)展到疾病末期時(shí)。證據(jù)還表明，與CKD和尿毒癥毒素（例如同型半胱氨酸或?qū)追樱┫嚓P(guān)的促炎狀態(tài)可以加速干細(xì)胞衰老和細(xì)胞凋亡。

最近的一項(xiàng)薈萃??分析表明，間充質(zhì)干細(xì)胞的療法在慢性腎病的臨床前模型中是有效的，并且全身施用間充質(zhì)干細(xì)胞被認(rèn)為可以安全地治療人類的腎臟和心血管疾病。然而，間充質(zhì)干細(xì)胞療法在治療慢性腎病的臨床轉(zhuǎn)化仍處于早期階段，最佳細(xì)胞來源、給藥方式和預(yù)期臨床效果仍未得到很好的表征。

因此，我們開展了一項(xiàng)開放性試點(diǎn)研究，以評(píng)估單次注射自體脂肪組織來源的MSCs (AT-MSCs) 治療慢性腎病的安全性和有效性。

方法

自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞以100萬個(gè)細(xì)胞/kg的劑量靜脈輸注到6名慢性腎病患者體內(nèi)。在間充質(zhì)干細(xì)胞輸注前和輸注后一年，患者病情穩(wěn)定并隨訪一年。

主要結(jié)果

慢性腎病功能參數(shù)的變化，包括間充質(zhì)干細(xì)胞輸注后12個(gè)月內(nèi)的GFR和定量24小時(shí)尿蛋白排泄率。由于這項(xiàng)研究的試點(diǎn)性質(zhì)和沒有對(duì)照組的小樣本量，變量在治療前12個(gè)月（控制期）進(jìn)行測(cè)量，并與MSC給藥后12個(gè)月（干預(yù)期）的測(cè)量值進(jìn)行比較。

次要結(jié)果

提示與治療相關(guān)的不良事件或警告的臨床或生化變化如下所述。

結(jié)果

輸液安全和患者隨訪

所有輸注均具有良好的耐受性，并且沒有報(bào)告與治療相關(guān)的不良事件。為評(píng)估疾病進(jìn)展，患者在進(jìn)入研究前12個(gè)月通過優(yōu)化和穩(wěn)定治療穩(wěn)定病情，然后隨訪一年。表1總結(jié)了所有數(shù)據(jù)。

蛋白尿測(cè)量

在治療前的12個(gè)月內(nèi)，6名患者中有4名表現(xiàn)出蛋白質(zhì)排泄增加（增加20%至205%）。相反，在輸注MSC 后的12個(gè)月內(nèi)，除4號(hào)腎發(fā)育不良患者外，所有病例的蛋白尿均從基線中位數(shù)0.75g/天（范圍0.15–9.57）下降至0.54（范圍，0.01-2.66克/天）輸注后第12個(gè)月（P=0.046）（圖2和補(bǔ)充表 1）。一名患者在輸注后表現(xiàn)出10%的下降，一名患者表現(xiàn)出60%的下降。值得注意的是，盡管MSC治療后患者4的蛋白質(zhì)排泄絕對(duì)水平?jīng)]有下降，但在MSC輸注后12個(gè)月內(nèi)觀察到的蛋白尿增加百分比僅為12%，而在輸注前12個(gè)月內(nèi)為205%，建議改進(jìn)。

為了評(píng)估疾病進(jìn)展的變化，患者 (Pat) 在進(jìn)入方案之前通過優(yōu)化和穩(wěn)定治療穩(wěn)定了12個(gè)月，并在AT-MSC給藥后隨訪了一年。除患者4外，所有病例的蛋白尿均有所減少，從基線時(shí)的中位數(shù)0.75克/天（范圍0.15-9.57）到一個(gè)月時(shí)的中位數(shù)0.54（范圍0.01-2.66克/天）輸注后12 ( P=0.046)。為了簡(jiǎn)化曲線，僅描繪了主要的三個(gè)時(shí)間點(diǎn)（治療前12個(gè)月、輸注時(shí)間、治療后12個(gè)月）。

肌酐和MDRD eGFR

總體而言，通過血漿肌酐水平和MDRD eGFR評(píng)估的腎功能在MSC輸注后12個(gè)月時(shí)有所下降，盡管這種下降沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 ( P=0.065)。除患者4外，所有病例的eGFR均略有下降，范圍為7.5%至49.0%。

注射AT-MSC前后12個(gè)月時(shí)，通過血漿肌酐和MDRD估計(jì)的腎小球?yàn)V過率 (eGFR) 估計(jì)的腎功能。除患者4外，所有個(gè)案均顯示MDRD eGFR 略有下降，范圍從7.5%到 49%。每個(gè)患者治療前和治療后的回歸分析的eGFR斜率沒有顯著差異。為了簡(jiǎn)化曲線，僅描繪了主要的三個(gè)時(shí)間點(diǎn)（治療前12個(gè)月、輸注時(shí)間、治療后12個(gè)月）。

討論

雖然并非所有6名患者的反應(yīng)都相同，但這些結(jié)果表明，自體AT-MSC輸注減少了6名患者的24小時(shí)蛋白尿，而沒有明顯的不良反應(yīng)。

關(guān)于干細(xì)胞治療慢性腎病的可能機(jī)制的證據(jù)越來越多。MSCs能夠自我更新、增殖和遷移到受損區(qū)域，在那里它們可以分化成成熟的功能細(xì)胞。由于在ivMSC輸注后可能會(huì)出現(xiàn)低水平的持續(xù)組織植入，因此人們認(rèn)為治療益處主要由營養(yǎng)和/或免疫介導(dǎo)的作用來解釋。MSC的免疫活性由分泌分子和細(xì)胞間接觸介導(dǎo)，并且可能涉及樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和多種 T 輔助細(xì)胞。顯著的旁分泌和營養(yǎng)作用是由血管生成和抗細(xì)胞凋亡因子（如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、胰島素生長(zhǎng)因子和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子）的分泌介導(dǎo)的。MSC產(chǎn)生的廣泛的分泌和免疫調(diào)節(jié)因子庫有可能促進(jìn)腎臟再生，因?yàn)镸SC條件培養(yǎng)基可以提供與直接細(xì)胞相當(dāng)?shù)哪I臟保護(hù)作用。

結(jié)論

總之，我們報(bào)告了一項(xiàng)初步試驗(yàn)研究，提供證據(jù)表明可以為慢性腎病患者的細(xì)胞治療生成自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，并且輸注治療不會(huì)在治療后的一年內(nèi)引起不良事件。

自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞顯示出改變慢性腎病進(jìn)展的潛力，因?yàn)橹委煖p少了尿蛋白排泄，尿蛋白排泄是腎臟疾病進(jìn)展的眾所周知的替代標(biāo)志物。這種有希望的初步結(jié)果證明設(shè)計(jì)和進(jìn)行未來的臨床試驗(yàn)是合理的，這些試驗(yàn)進(jìn)一步評(píng)估自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞治療慢性腎病的臨床反應(yīng)和分子機(jī)制，并評(píng)估反應(yīng)患者的特征以告知未來最好的治療候選人。